肉的宰后嫩化内容归因于肌原仟维空间结构的的受到破坏，肌原仟维空间结构的是由内源性蛋清酶溶解影响酶溶解肌原仟维和肿瘤神经血细胞系系骨架蛋清酶会造成的。与一百多年来不停是加关注亮点的钙蛋清酶酶有所差异，胱天蛋清酶酶（caspases）之前成了感好奇心的时候题。胱天蛋清酶酶在肿瘤神经血细胞系系凋亡的施行过程起着至关首要的效用，这之中caspase-3在去世蛋清酶溶解影响中的效用是一定要多方位面和僵化的，故此必玩进步骤研发。S-亚硝基化按照缓解钙解放、势能分泌、蛋清酶质溶解和肿瘤神经血细胞系系凋亡来缓解肉质地，还包括嫩度和持水效率。先前研发表明S-亚硝基化不错降低依靠线粒体的caspase-3级联影响，这可能会是肌群肿瘤神经血细胞系系凋亡和牛羊肉好品质变幻的问题。caspase-3的研发内容是其与肿瘤神经血细胞系系凋亡的感情，同时，很小有研发浅议S-亚硝基化缓解caspase-3的缘由。

2024年9月由苏州水产业二本大学张万刚副教授技术团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生态学为该研究提供了亚硝基化装饰组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

繁体中文小标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊论文：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2021年决定指数：5.7

发表过时刻：2024年9月

客机关单位：南京农业大学

理论研究建材：蛋白

拜谱出具技术性：亚硝基化修饰组学

技能规划：

一、科研成果

01.Caspase-3吸附性

近些年尚不模糊不清NO对caspase-3的减弱用会不会归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样的氧浓度梯度方向的GSNO最为外源性NO供应商，以引诱caspase-3的离体S-亚硝基化。的结果说明，与不会GSNO的组对比，100、200和400μM GSNO组的caspase-3灵灵活性有明显减轻（图1），与前者报到不一样。GSNO整理减轻caspase-3灵灵活性的隐藏的现象仍存在不足体现了。

图1 有所不同含量的GSNO进行处理对caspase-3活性酶类的关系

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化情况

探讨Caspase-3的亚硝基化数量，以阐述GSNO对Caspase-3的现象性。经GSNO净化处理后，加测到caspase-3球蛋白S-亚硝基化屈服强度延长（图2）。这么多最终结果呈现，外源性GSNO致力于可顺利完成帮助caspase-3的休外S-亚硝基化。真让人惊艳的是，在并没有GSNO都存在的比较组中加测到另一个很弱的S-亚硝基化带，这呈现caspase-3可能会发生内源性的S-亚硝基化。不仅而且，本探讨中caspase-3的S-亚硝基化数量较高，而caspase-3的催化活性有效降低，这与前的探讨相符。尽管，caspase-3的特异形S-亚硝基化淡化位点尚不弄清楚，还须要进一次的打磨。

图2 GSNO加工对caspase-3S-亚硝基化关卡的引响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化体现组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。橙色标志的队列带表S-亚硝基化肽，红颜色标志的C带表S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3挥发结蛋清

结血清充当的一种注重的体受损细胞骨架血清，在提升肌体受损细胞构成的构成完美性和抽缩性领域起着注重效果，探讨S-亚硝基化caspase-3对结血清生物可降解的比较敏理想化兼备注重重大意义。与Std（未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的初始状态肌食物植物纤维血清）组差距，0 μM GSNO组（肌原食物植物纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完美结血清含氧量相关系数减低，建议caspase-3对结血清兼备意向的血清淀粉水解学习能力。在GSNO孵育后，完美结血清的含氧量看不出增多（P < 0.05）。凡此种种，当GSNO质量浓度增大时，完美结血清的含氧量长期上浮（P < 0.05）（图5）。上述出现意味着，SNO淡化的caspase-3以水平面依靠的的方法促使结血清的生物可降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3分解结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3溶解肌钙淀粉酶-T

肌钙球淀粉酶酶-T (TnT)是原肌球球淀粉酶酶调控担任全身肌肉抽缩的丝条的所需肌原玻纤球淀粉酶酶。TnT的吸附特征描述是论文检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化先决条件下，caspase-3对TnT的吸附现象长为6如下，与Std组（没含caspase-3和GSNO的肌原玻纤）比较，caspase-3组中30 kDa TnT细节描写偏态增高，证明caspase-3参与者了TnT的吸附，不仅，caspase-3与GSNO的孵育若想形成30 kDa TnT上升。在100和200 μM GSNO组互相都没有论文检验到突出的不同之处(P > 0.05)，而当GSNO的质量浓度做到400 μM 时，该细节描写偏态变少(P < 0.05)。以下出现 证明了SNO装饰的caspase-3对TnT吸附的缓和目的。结球淀粉酶酶和TnT是caspase-3的敏感脆弱底物，而GSNO正确处理缩减caspase-3的催化活性酶类或者若想形成肌原玻纤球淀粉酶酶吸附层面缩减。结合以上所论，NO诱发的S-亚硝基化能否用装饰半胱氨酸残基来调控caspase-3的催化活性酶类，随之进一点损害其对结球淀粉酶酶和TnT的球淀粉酶酶蛋白质水解程度，若想损害鸡肉品级。

图6. S-亚硝基化caspase- 3可降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本钻研亟需一起探讨S-亚硝基化对caspase-3突显的会应响举例说明马上又对羊肉肌原黏胶纤维素身体外光降解的会应响。核蛋清S-亚硝基化就能够突显caspase-3的半胱氨酸残基，然而造成 caspase-3生物变低，进1步促使了其对羊肉肌原黏胶纤维素核蛋清的核蛋清电离力。

三、拜谱个人总结

调查主要采用了酶活核查，亚硝基化遮盖组学分享，WB等检验行为，出现血清S-亚硝基化可能遮盖caspase-3的半胱氨酸残基，这引致了caspase-3几丁质酶的大大减少，齐头并进三步政策调控了其对鸡肉肌原黏胶纤维血清的血清球蛋白水解本事。本调查为描述血清质亚硝基化对吃起来的政策调控措施带来一个多个新的上帝视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的淀粉酶酶质组学、遮盖淀粉酶酶质组学、产生组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列拜谱生物车辆，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺硝化作用、total氧化的完美重现、解离巯基，欢迎大家咨询！

参照论文资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663