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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
含糖子自我的缜密性和许许多多N-glycoproteins低表达具体方法技术水平使对N-glycosylation结构特征特征的表现的分析甚为不便。在监测低丰度的N糖基化装饰核球血清或肽段时,各举夹杂过多未装饰的核球血清肽断,这很特别容易将低丰度的糖基化装饰核球血清肽段的移动信号盖住。凝素亲和法是近年糖核球血清质组学中操作比较多泛的隔离丰度具体方法。凝集素(lectin)是类糖搭配核球血清质,能爱情专一区分某个独特结构特征特征的单糖或聚糖中当前的糖基编码序列而与之搭配,她们与糖链可逆反应非共价搭配,糖核球血清或糖肽被凝集素抓取以后,常用当前的单糖使用竞争性搭配凝集素将糖核球血清或糖肽过柱放进去。 球蛋清质含量历经酶解后灵活运用凝集素(lectin)含有N-糖基化肽段,以后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中割除做连接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该外理迫使Asn大原子量不断增加2.9890Da。后面用高精确度等级LC-MS质谱仪判断脱糖后的肽段,使用检索式数据源库,查证脱糖后大原子量和理论上大原子量的发展还有糖基化表达肽段的回文序列,所以选择该球蛋清质含量的N-糖基化位点。N-糖基化位点选择以后,再灵活运用label-free的基本原理对其做参考值定性分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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