
太平洋西北国家实验室生物科学部的Tong Zhang,等在Redox Biology发表了题为“Regulation of hyperoxia-induced neonatal lung injury via post-translational cysteine redox modifications”的文章。该研究在暴露于高氧环境下的Scnn1b过表达小鼠中观察到大量的SSG变化,这表明ENaC在细胞调节中起着至关重要的作用。通过TMT淀粉酶质组和谷胱甘肽掩盖淀粉酶质混合物析,发现Scnn1b过表达可能通过调节细胞粘附、凝血和蛋白水解等特定过程来保护高氧诱导的肺损伤。这项研究提供了肺中蛋白质氧化的全景视图,并强调了氧化还原调节在O2 诱导的肺损伤中的重要性。
软文称谓: Regulation of hyperoxia-induced neonatal lung injury via post-translational cysteine redox modifications(Redox Biology, 2022, IF=11.4)
研究探讨村料:Scnn1b过表达小鼠、野生型小鼠
组学能力:谷胱甘肽修饰蛋白质组、TMT蛋白质组
PART.01、分析指导思想
PART.02、研发然而
1.萎缩性高氧下新生开学儿转基因水稻遗传Scnn1b肺表型
是为了检验上皮钠安全通道在减少硫化断裂中起重机要效应,科研者们实施了什么是生化数据研究和质谱的检测。图甲1A-C如下,WT小鼠急慢性型吸进去Fi O 2和Scnn1b过理解小鼠可不可以以新增损害指检测值、嗜中性化粒細胞侵润性、硫化应激反应性,而急慢性型高 O 2曝露严重降底Scnn1b过理解肺的某些检测值。显然,与确保在急慢性型85% Fi O 2曝露下的WT肺相对比,转DNA水稻遗传Scnn1b肺中体验促钎维化想法DNA遗传的mRNA关卡严重较低(图1D-F)。利用MS蛋白质组学数据研究,正常的氧下的转DNA水稻遗传Scnn1b小鼠的监测站BALF肺断裂和应激反应性的标注图片物关卡严重要高于WT小鼠,高氧就能够进两步诱导性某些标注图片物的关卡(图1G-I)。某些导致体现了Scnn1b的过理解小鼠呈现出肺断裂和疾病关卡的提高,但已经对高氧曝露介导的肺断裂/疾病和钎维化具备因素的养护效应。
图1 Scnn1b转染色体肺在慢性型高氧下的表型(图源:Zhang T, et al., Redox Biology, 20
2.高氧诱发下的整个蛋白酶表达出来不同
是为了辨别的五种表观遗传遗传型在高氧被暴露后丰度遭受差异性变动的蛋清质,确定了表观遗传遗传精神力讲解,最终结果反映出“腐蚀替换期间”是两者表观遗传遗传型现有的偏重要且拥有的路线(图2A)。在该路线的两者表观遗传遗传型中间了解到NDUA6和NDUS1,以及每段种在高氧因素下都现象出丰度的才能减少(图2B)。基本概念“几丁质进行吸附新陈细胞代谢期间”的找回,在慢性强氧下转表观遗传遗传Scnn1b小鼠的几丁质进行吸附新陈细胞代谢备受了电磁干扰,涉及到CHIA、CHIL3和CHIL4的差异性调低(图2C)。综合上面的与此同时,高氧引导转表观遗传遗传Scnn1b小鼠的蛋清变动比也是型小鼠更多的样化。
图2 高氧会后果相应生物学具体步骤中蛋清质的丰度(图源:Zhang T, et al., Redox Biology, 202
3.高氧帮助的淀粉酶质SSG体现的波动
本探究使用不一致性遮盖的Cys位点来确保SSG调控对高氧发生反应的胆固醇质和经由。在SSG遮盖中体现了特殊变动的这样胆固醇质的dna本体论论表达出来,高氧环境下多怪物的进程 在天然的型或转dnaScnn1b小鼠中显眼过度表达出来(图3A)。在转dnaScnn1b小鼠中,“组织细胞细胞迁移”被人认为是最具带表性的类,还转dna小鼠的Cys位点比天然的型小鼠多(图3B)。与此同时,血疑固相关的的高等怪物的进程 中包含的Cys位点的胆固醇,在转dnaScnn1b小鼠高氧后具体展示出上涨的谷胱甘肽化(图3C)。对“胆固醇溶解”类深一点入的观察植物论述了多体现了SSG级别调整的Cys位点的胆固醇质(图3D)。
图3 高氧干扰小鼠肺中与各种生物制品学过程中有关系的血清质的谷胱甘肽化
4.高氧诱骗的球蛋白总氧化反应的转变
确认測量蛋清质硫醇总钝化来声明关与蛋清质SSG的发掘能不正确无误,报告表达Cys位点的SSG和总钝化数据表格表格集两者有较强的有关系性(图4A)。这样数据表格表格还注意了在SGG或总钝化横向下,其Cys位点钝化横向备受高氧扰动,这表达SSG是蛋清质半胱氨酸钝化横向的查测的标准之首(图4B)。
图4 高氧后过表达出Scnn1b小鼠Cys位点的总巯基氧化的
5.TMT淀粉酶质组的差异化的调节有利于促进SCNN1B的保证反应
本调查契机选择可以可进一步上皮钠清算通道的β亚基(β-ENaC)对高氧诱导型的肺影响的自我保护能力的蛋清质。总蛋清丰度的剖析呈现了这两种遗传基因型小鼠中间差异化调接的蛋清质。这么多蛋清质进行了的不同的生物制品学整个过程,还涵盖蛋清质翻折、ATP制成和体细胞器组织安排(图5A)。另外当中的更多蛋清质在天然的型小鼠中表現出丰度的上升,还涵盖与钝化应激状态重视有关于的蛋清质翻折(图5B-C)。
图5 过表达方法Scnn1b导至高氧介导的淀粉酶丰度不同的性别差异调整
PART.03、工作小结
肺谷胱甘肽修饰语核氨基酸组与TMT核氨基酸组的结果表明高氧不会引起氧化还原稳态的剧烈干扰。此外,Scnn1b过表达可能通过调节细胞粘附、凝血和蛋白水解等特定过程来保护高氧诱导的肺损伤。SSG对特定蛋白质的调节的新发现加深了我们对肺对高 O 2反应的氧化还原调节作用的理解,强调了氧化还原调节在肺部的重要性。
PART.04、拜谱总结
谷胱甘肽(GSH)是哺乳动物细胞内丰度最高的低分子抗氧化剂,对维持细胞氧化还原状态具有重要作用。蛋白质的S-谷胱甘肽修饰可改变蛋白的结构,影响蛋白质的复合体形成以及多种细胞学功能。拜谱生物技术是 开家中国内地领先于的两组学机构,在半胱氨酸氧化物修复呈现范围组积淀了丰富多样的该项目实践经验,成功助力Nature文章发表,可提供棕榈酰化、亚硝基化、谷胱甘肽化、次磺碱化、硫巯基化、Total 空气氧化抹除、解离巯基蛋清质组学拜谱生物,其中谷胱甘肽修饰蛋白质组目前可鉴定超过2000多种的蛋白质,欢迎大家咨询!
参看论文:Zhang T, Day NJ, Gaffrey M, Weitz KK, Attah K, Mimche PN, Paine R 3rd, Qian WJ, Helms MN. Regulation of hyperoxia-induced neonatal lung injury via post-translational cysteine redox modifications. Redox Biol. 2022; 55:102405. doi: 10.1016/j.redox.2022.102405.